Leczenie przerzutowego czerniaka za pomocą autologicznych komórek T CD4 + przeciwko NY-ESO-1 czesc 4

Klon komórek T był niewykrywalny w próbkach preinfuzji od pacjenta. Jednak po infuzji nastąpił szybki wzrost częstości komórek klonu: stanowiły one prawie 2,0% wszystkich jednojądrzastych komórek krwi obwodowej w 3. dniu i pozostawały wykrywalne we krwi pacjenta przez ponad 80 dni (Figura 2) . W tym czasie częstotliwość komórek klonu wahała się między 0,7 a 3,0% całkowitej liczby komórek jednojądrzastych. Ocena kliniczna
Skany CT i PET uzyskane 2 miesiące po infuzji komórek T nie wykazały żadnych objawów choroby, a po 22 miesiącach obserwacji nie stwierdzono żadnych oznak nawrotu (Figura 1). W czasie ostatniego kontaktu z pacjentem, 26 miesięcy po infuzji komórek T, nie otrzymał on żadnego innego leczenia i miał normalną funkcję, ze stanem sprawności Karnofsky ego wynoszącym od 90 do 100%. Nie było wykrywalnych ostrych lub długotrwałych skutków toksycznych związanych z autoagresją (np. Zapalenie skóry, bielactwo, zapalenie błony naczyniowej i zapalenie jąder).
Odpowiedzi komórek T na niespokrewnione antygeny
Figura 3. Figura 3. Zwiększenie odpowiedzi komórek T na antygeny nowotworowe związane z czerniakiem. Odpowiedzi komórek T specyficzne względem antygenu na antygen czerniaka rozpoznawany przez komórki T (MART-1), antygen czerniaka 3 (MAGE-3), NY-ESO-1 i glikoproteinę 100 (GP100) oceniano w próbkach jednojądrzastych krwi obwodowej komórki (PBMC) zebrane przed infuzją i w punktach czasowych do 12 tygodni po infuzji. Autologiczne komórki dendrytyczne (DC), które transfekowano antygenem nowotworowym kodującym RNA, użyto do stymulowania PBMC w testach immunospotowych związanych z enzymem. Częstotliwość odpowiedzi swoistej dla antygenu jest przedstawiona jako liczba reaktywnych plam na 100 000 PBMC (kwadraty). Równoległe studzienki z DC transfekowanymi kontrolnym RNA zastosowano w każdym punkcie czasowym (diamenty). Każdy punkt danych jest średnią wartości z potrójnych studzienek. Po wlewie obserwowano znaczące zwiększenie odpowiedzi komórek T zależnych od antygenu w przypadku MAGE-3 (panel A), MART-1 (panel B) i NY-ESO-1 (panel C), ale nie w przypadku GP100 (panel D) . Paski I oznaczają błędy standardowe.
Nawet jeśli tylko 50 do 75% komórek nowotworowych eksprymowało NY-ESO-1, cały guz cofnął się po infuzji klonu komórek T CD4 + specyficznego dla NY-ESO-1. Ta niekonsekwencja doprowadziła nas do postulowania, że poddany infuzji klon wywoływał odpowiedź immunologiczną, która była szersza niż oczekiwano. Aby przetestować tę hipotezę, oceniliśmy odpowiedzi komórek T na dwa inne antygeny związane z czerniakiem, które uległy ekspresji w guzie pacjenta, MART-1 i MAGE-3. Stosując autologiczne komórki dendrytyczne, które zostały poddane transfekcji RNA w celu ekspresji tych antygenów, mogliśmy wykryć komórki T we krwi pacjenta, które reagowały in vitro na MART-1 lub MAGE-3. Te komórki T były niewykrywalne przed infuzją limfocytów T CD4 + specyficznych dla NY-ESO-1, ale stały się wykrywalne w czasie, który zbiegł się z regresją guza i utrzymywał się przez co najmniej 3 miesiące. Nie znaleźliśmy dowodów na obecność limfocytów T, które mogłyby odpowiedzieć na glikoproteinę 100, która była słabo wyrażana przez nowotwór (Figura 3).
Dyskusja
Opisujemy metodę in vitro do opracowywania klonów komórek T CD4 + ze specyficznością antygenu nowotworowego i zastosowania jednego takiego klonu do leczenia pacjenta z przerzutowym czerniakiem.
[podobne: eskulap białogard, neomedica poznań, usg tarczycy bydgoszcz ]