Blokada PD-1 za pomocą Pembrolizumabu w zaawansowanym raku z komórek Merkla czesc 4

Szkiełka poddano indukowanemu ciepłem epitopowi pobierania i blokowaniu endogennej peroksydazy przed inkubacją z pierwszorzędowym przeciwciałem (klon anty-PD-L1 mAb 22C3 [Merck Research Laboratories] lub kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-PD-1 [R & D Systems]). Wiązanie antygen-przeciwciało wizualizowano za pomocą 3,3 -diaminobenzydyny (Dako) dla PD-L1 lub Alexa Fluor 488 (Invitrogen) dla PD-1. Próbki uznano za pozytywne dla PD-L1, jeśli 1% lub więcej komórek nowotworowych eksprymowało PD-L1. Skrawki nowotworowe zabarwiono również anty-CD8 (klon 144B, Dako) w celu wykrycia limfocytów T CD8 +. Wewnątrzmacotorowe limfocyty T CD8 + (całkowicie otoczone guzem i nie opierające się podścieliskiem) zostały ocenione przez dermatopatologa, który nie był świadomy cech pacjenta, jak opisano wcześniej25 i na rysunku S2 w dodatkowym dodatku. Wybrane próbki oceniano za pomocą wielospektralnej analizy immunohistochemicznej, która zapewniała jednoczesne wykrywanie i oznaczanie ilościowe specyficznej dla neuronu enolazy (komórki guza Merkel), CD8, CD68 (makrofagi), PD-1 i PD-L1 (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku ). Analiza statystyczna
Pacjenci, którzy otrzymali co najmniej jedną dawkę pembrolizumabu zostali włączeni do analiz bezpieczeństwa i skuteczności. Dane są zgłaszane od 12 lutego 2016 r. Do oceny odpowiedzi na leczenie zastosowano testy radiologiczne i badania fizykalne zgodnie z RECIST, wersja 1.19. Najlepszą odpowiedź ogólną zdefiniowano jako najlepszą odpowiedź zarejestrowaną od początku leczenia do czasu choroby progresja lub nawrót. Wskaźnik obiektywnej odpowiedzi obliczono jako odsetek pacjentów, którzy mieli całkowitą lub częściową odpowiedź potwierdzoną przez kolejne badanie obrazowania radiologicznego według RECIST, wersja 1.1,19 wśród wszystkich pacjentów, którzy otrzymali co najmniej jedną dawkę pembrolizumabu i mieli przynajmniej jedna ocena podczas leczenia. Dokładne przedziały ufności Cloppera-Pearsona zostały wygenerowane dla wskaźnika odpowiedzi. Czas reakcji określono jako odstęp czasu między pierwszą podaną dawką leku a datą pierwszej odpowiedzi. Czas odpowiedzi określono jako odstęp czasu między datą pierwszej odpowiedzi a datą progresji choroby lub zgonu. W przypadku pacjentów, którzy nie mieli progresji choroby lub umierają, końcową datą trwania odpowiedzi było późniejsze z ostatniej oceny choroby lub ostatniego podawania leku. Czas przeżycia bez progresji określono jako przedział czasu od daty podania pierwszej dawki pembrolizumabu do daty progresji choroby lub zgonu, w zależności od tego, które zdarzenie wystąpiło wcześniej, i został oszacowany za pomocą metody Kaplana-Meiera. 26 Bezwarunkowy test dokładny zastosowano do oceny związku między ekspresją PD-L1 a odpowiedzią kliniczną lub statusem wirusa.27 Test U Manna-Whitneya zastosowano do porównania rozkładu wyników CD8 między pacjentami zakażonymi wirusem a pacjentami z niedoborem wirusów.
Wyniki
Charakterystyka pacjenta
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka pacjenta. W sumie 26 pacjentów z stadium IIIB lub IV raka komórek Merkela i stan sprawności ECOG 0 lub zostali włączeni od stycznia 2015 r. Do grudnia 2015 r. I otrzymali co najmniej jedną dawkę pembrolizumabu
[podobne: talasemia objawy, implant zęba cena warszawa, krzysztof wanio ]